1、机械通气致肺损伤模型
实验动物:兔子、大鼠
获得方式:使用呼吸机,予以特定的通气模式(例如:大鼠接受20mL/Kg的潮气量、85次/min的呼吸频率2h)
模型特点:急性肺损伤病理特征之一的透明膜常出现于大型的实验动物模型,而在大鼠或小鼠中很少出现,因此进行机械通气致肺损伤造模动物的选择需要谨慎。
2、吸入性急性肺损伤模型
实验动物:小鼠、大鼠、兔子
造模试剂:香烟烟雾、空气污染物及有害气体、脂多糖、活菌
获得方式:通过吸入、气管内滴入或静脉滴注脂多糖、活菌、烟雾、有害化学试剂及气体等导致肺组织损伤;反复损伤引起肺损伤。
模型特点:脂多糖引起的低氧血症较少;可以根据具体的研究类型选择造模试剂及方式。
病理学评估
病理学评估病理学观察是判定肺损伤程度的金标准。优点在于取样简单,观察评估简便准确;缺点在于只能将动物处死后取材,可能因为肺损伤后活体动物的病理表现存在一定的差异。模拟 ALI的动物模型实验基本用此种方法,步骤为:处死动物后将肺取出,利用石蜡制片及H-E staining法将肺组织切片固定染色,在光学显微镜下观察。肺损伤组的肺组织病理学表现为肺泡间质性水肿、肺泡壁厚度增加、中性粒细胞数量增多、肺组织斑块状出血。其病理学表现随损伤程度加重而更加明显。
炎性介质浓度评估
支 气 管 肺 泡 灌 洗 液 (BALF) 以及血清中炎性介质含量是除病理学外用到最多的评估肺损伤严重程度的方法。通过重复注射及回抽PBS缓冲液收集BALF,或者直接留取血清样品进行测定。在经过离心固定等操作后进行巨噬细胞及中性粒细胞计数,通过酶联免疫吸附测定和蛋白质印迹法分析 IL-1β、NLRP3、NF-κB等指标的浓度,以及通过蛋白电泳等方法计算蛋白质浓度。
血气分析
由于肺损伤时通气血流比例失衡,氧结合能力下降,动脉血氧分压下降,因此血气分析 (BGA)可以作为评估肺损伤程度的重要指标。在肺损伤时,动脉血氧分压可有不同程度的下降。但其结果受影响因素较多,因此只能作为参考而不是诊断的指标。
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